樣本準(zhǔn)備
1. 提供外泌體懸液即可,未純化樣本也可以上機(jī)檢測;
注意:NTA僅提供粒徑分布情況和顆粒濃度,無法區(qū)分外泌體與非外泌體成分;當(dāng)然也可先利用外泌體特異性標(biāo)記物進(jìn)行熒光標(biāo)記,則可以獲知外泌體特定亞群的含量。
2.儀器的檢測區(qū)間是10^7 particles/ml,且有濃度檢測下限,為10^5 particles/ml,進(jìn)樣量不少于2ml;一般來說,會對樣本稀釋后進(jìn)樣;
我司無法準(zhǔn)確建議送樣量;檢測需要量與樣本本身濃度有關(guān),樣本濃,則用量小,反之則多,根據(jù)檢測經(jīng)驗,樣本取用量一般在2μl-100μl不等,取用量大于50μl時大多由于樣本分泌量過低、提取失敗或者對樣本有過多稀釋。一般建議送樣量不低于30μl,如樣本珍貴,可聯(lián)系我司寄回,運(yùn)費(fèi)視具體情況收取。
外泌體的生物學(xué)功能:1、首1次報道的外泌體生物功能是紅血球成熟過程中排出來的蛋白質(zhì)。
2、進(jìn)一步的研究表明其功能包括排泄不必要的蛋白質(zhì)和RNA等物質(zhì)。
3、可促進(jìn)生物體免1疫應(yīng)答反應(yīng)。
4、對凝血和血管生成其促進(jìn)作用。
5、可通過化學(xué)信號參與癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。
6、在哺乳期的免1疫調(diào)節(jié)過程中起到重要的作用。
7、不僅參與觸發(fā)下游信號傳導(dǎo),而且特異性靶向受體細(xì)胞和交換蛋白。
8、可提供特殊的核酸且起到運(yùn)輸功能。
9、作為細(xì)胞-細(xì)胞之間傳遞信息的重要分子。
10、在病毒和朊蛋白等多種病原體之間起著獨(dú)1特的作用。
鐵死亡主要有以下幾個特點(diǎn):
① 鐵死亡,細(xì)胞死亡過程中伴隨著大量的鐵離子的累積,同時還會出現(xiàn)脂質(zhì)過氧化,ROS升高,也有一些調(diào)控鐵穩(wěn)態(tài)和脂質(zhì)過氧化代謝等方面的基因發(fā)生變化,
② 鐵死亡,在細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)中,會出現(xiàn)比正常細(xì)胞小的線粒體,且線粒體膜皺縮,外泌體電鏡檢測,同時線粒體嵴減少或消失,外膜破碎,但細(xì)胞核中形態(tài)變化不明顯。
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