武漢科銳諾生物(查看)-染色體原位雜交技術(shù)服務(wù)

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武漢科銳諾生物科技有限公司

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公司官網(wǎng)：www.whkrn.com
公司地址：湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號(hào)武漢國(guó)英種子A棟1樓

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原位雜交試驗(yàn)

收集斑馬魚(yú)的胚胎，在Holfretor水中培養(yǎng)，到達(dá)所需要的發(fā)育時(shí)期時(shí)，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，染色體原位雜交技術(shù)服務(wù)，二十四小時(shí)后用50%2%多聚甲醛溶液洗，然后換成，在-20C 保存，待用（兩天和兩天以上的胚胎需要用處理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養(yǎng)，可阻斷色素的形成）武漢科銳諾生物科技有限公司

分子病理診斷，是指應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)，從基因水平上檢測(cè)細(xì)胞和組織的分子遺傳學(xué)變化，以協(xié)助病理診斷和分型、指導(dǎo)靶向、預(yù)測(cè)反應(yīng)及判斷預(yù)后的一種病理診斷技術(shù)。分子病理診斷又稱分子病理檢查、分子病理檢測(cè)、分子病理技術(shù)。從本質(zhì)上講，凡是基于組織和細(xì)胞分子水平上的疾病診斷都是分子病理診斷，這是廣義的分子病理診斷，如組化診斷。但目前公認(rèn)的是狹義的分子病理診斷，即基于細(xì)胞或組織基因水平的病理診斷。

雜交結(jié)束后，去除雜交液，立即于室溫把濾膜放入大體積（300-500ml）的2×SSC和0.1% SDS溶液中，輕輕振搖5分鐘，并將濾膜至少翻轉(zhuǎn)一次。重復(fù)洗一次，同時(shí)應(yīng)避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次，每次1-1.5小時(shí)。此時(shí)已可進(jìn)行自顯影。如背景很高或?qū)嶒?yàn)要求嚴(yán)格的洗膜條件，可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。

把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后，把濾膜（編號(hào)面朝上）放在一張保鮮膜上，并在保鮮膜上作幾個(gè)不對(duì)稱的標(biāo)記，以使濾膜與性自顯影片位置對(duì)應(yīng)。

用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加X(jué)片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時(shí)。

底片顯影后，在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標(biāo)記陽(yáng)性雜交信號(hào)的位置，同時(shí)在不對(duì)稱分布點(diǎn)的位置上作出標(biāo)記?？蓮牡灼先∠峦该骷?，通過(guò)對(duì)比紙上的點(diǎn)與瓊脂上的點(diǎn)來(lái)鑒定陽(yáng)性菌落。

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